[1]王〓晔,韩红玉,董〓辉,等.柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达[J].复旦学报(自然科学版),2015,02:252-256.
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柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达(PDF)
《复旦学报》(自然科学版)[ISSN:/CN:]
- 期数:
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2015年02
- 页码:
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252-256
- 栏目:
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- 出版日期:
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2015-04-14
文章信息/Info
- Title:
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- 作者:
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王〓晔; 韩红玉; 董〓辉; 赵其平; 朱顺海; 姜连连; 薛〓璞; 舒凡帆; 黄〓兵
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- Author(s):
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- 关键词:
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- Keywords:
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- 分类号:
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- DOI:
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- 文献标识码:
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A
- 摘要:
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为了检测柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella, Et)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor, Serpin)基因(EtSerpin)在真核细胞293T中的表达情况,以Et孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增含完整Serpin开放阅读框的序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,构建pGEM-Teasy-EtSerpin质粒,双酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核重组表达质粒pCAGGS-EtSerpin.该重组质粒经酶切和测序鉴定正确后转染293T细胞,用间接免疫荧光法和Western blot鉴定EtSerpin基因的表达情况,间接免疫荧光实验可以检测到红色荧光,Western blot结果显示出大小约45.5kDa的目的蛋白条带,结果表明构建的EtSerpin可以在293T细胞中获得表达.
- Abstract:
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更新日期/Last Update:
2015-04-15